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Non eseguire più di un’applicazione software durante il funzionamento (compreso lettore

CD e salvaschermi). Non installare componenti software o hardware di altri produttori.

ciò potrebbe bloccare l’Autostainer Plus e invalidare la garanzia.

Non stampare le etichette per i vetrini mentre l’Autostainer Plus è in funzione.

Dako raccomanda di non usare la funzione Priority Slide (vetrino prioritario) quando un

prodotto farmaco-diagnostico viene processato. Ciò comprende HercepTest (K5205) e

EGFR pharmDx (K1494).

L’immunoistochimica è un processo diagnostico a più passi (multi-step) che richiede una

formazione specifica nella selezione appropriata di reagenti, selezione dei tessuti,

fissazione, processazione, preparazione dei vetrini IHC e interpretazione dei risultati

della colorazione.

La colorazione tissutale dipende dal trattamento e dalla processazione cui viene

sottoposto il tessuto prima della colorazione. La fissazione, il congelamento, lo

scongelamento, il lavaggio, l’asciugatura, il riscaldamento e la sezione condotti in modo

non corretto, o la contaminazione con altri tessuti o fluidi, possono produrre artefatti,

intrappolamento (trapping) anticorpale o risultati falsamente negativi. Risultati

incompatibili possono essere dovuti a modifiche dei metodi di fissazione e di inclusione

o ad irregolarità intrinseche al tessuto. Una colorazione a contrasto eccessiva o

incompleta può compromettere la validità dei risultati.

L’uso di fissativi vecchi o non tamponati, oppure l’esposizione dei tessuti a fonti di calore

eccessivo (oltre i 60 °C) durante la processazione, può provocare una diminuzione della

sensibilità della colorazione.

I sieri normali/non immuni provenienti dalla stessa fonte animale degli antisieri secondari

usati nelle fasi di bloccaggio possono causare risultati falsamente negativi o falsamente

positivi, a causa di autoanticorpi o di anticorpi naturali. Si possono osservare risultati

falsamente positivi, dovuti a legame non immunologico dei reagenti sulle sezioni

tessutali. In alcuni casi, l’applicazione di un reagente bloccante alternativo prima

dell’incubazione con l’anticorpo primario può essere utile per ridurre la colorazione di

fondo. Si raccomanda l’uso del reagente bloccante Dako Protein Block Serum-Free

(codice n. X0909).

Reazioni negative inattese nelle neoplasie poco differenziate possono esser dovute a

perdita o a marcata diminuzione dell’espressione antigenica, o a mutazioni nonsense nel

gene o nei geni che codificano per l’antigene. Una colorazione positiva inattesa nei

tumori può essere dovuta all’espressione di un antigene non espresso normalmente in

cellule normali morfologicamente simili, oppure alla persistenza o all’acquisizione di un

antigene in una neoplasia che sviluppa caratteristiche morfologiche ed

immunoistochimiche associate ad un’altra linea cellulare (differenziazione divergente).

La classificazione istopatologica delle neoplasie non è una scienza esatta e alcuni dati

presenti in letteratura possono essere di controversa validità.

L’interpretazione clinica di ogni colorazione positiva o della sua assenza va

accompagnata da studi morfologici e istologici, usando i controlli appropriati. Le

valutazioni vanno effettuate alla luce della storia clinica del paziente e delle altre

metodiche diagnostiche adoperate. Un patologo qualificato, che abbia la necessaria

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